如何选择合适的保护柱来匹配色谱柱?
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一、选择?;ぶ脑?/span>
1、填料类型:
?;ぶ奶盍嫌τ敕治鲋奶盍暇哂邢嗨频幕灾屎头掷牖啤@?,反相色谱柱通常搭配反相保护柱,如C18、C8等;正相色谱柱则需选择正相?;ぶ绻杞旱忍盍?。
一般情况下,选择与分析柱相同的填料类型是最佳选择。
2、柱尺寸:
?;ぶ哪诰逗统ざ扔τ敕治鲋嗥ヅ洹R话憷此?,?;ぶ哪诰队敕治鲋嗤蚵孕。ざ韧ǔT?0-50mm之间,以确保在不增加过多柱压的情况下提供有效的?;?。
?;ぶ寤捶治鲋寤?%~10%选择。例如,对于4.6×250mm的分析柱,其体积约为4mL,?;ぶ寤裳≡裨?.2~0.4mL之间为宜。
3、样品特性:
对于复杂样品,如生物样品、环境样品等,其中可能含有较多的杂质、蛋白质、脂质等,应选择具有较强吸附能力和高分辨率的?;ぶ?,以更好地去除杂质,?;ど字?。
如果样品的酸碱度较强,需要选择耐酸碱性好的?;ぶ?,如采用特殊处理的不锈钢柱体或耐酸碱的聚合物材料制成的保护柱,以防止柱体被腐蚀。
4、分析需求:
如果对分离度要求较高,需要选择柱效高、填料粒径小的?;ぶ?,以确保在?;ど字耐?,不会对分离效果产生明显影响。
在高通量分析中,应选择柱压较低、流通性好的?;ぶ?,以减少系统压力,提高分析速度。
二、?;ぶ慕峁购土臃绞?/span>
1、结构:
卡套式?;ぶ褐卓煞锤词褂?,柱芯污染后可替换。购买时需要注意柱芯中的填料类型,确保柱芯与柱套匹配,否则可能导致峰型异?;蚵┮?。
直接填装短柱:这种结构的保护柱实质就是短的色谱柱,一般填装的填料与分析柱填料完全一样。生物样品分析中,这种类型?;ぶ佣?,但缺点是一次性使用,污染严重时,只能报废。
2、连接方式:
独立式?;ぶ罕;ぶ头治鲋溆靡欢喂苈妨?,不用担心与分析柱在连接上的匹配问题。但使用管路连接时,连接不当容易产生死体积。
直连式?;ぶ罕;ぶ涌诖菸?,可直接与分析柱连接,死体积小,UPLC分析时建议选择直连式保护柱。购买时需保证接口与分析柱匹配。
三、使用?;ぶ淖⒁馐孪?/span>
1、安装与连接:
独立式?;ぶ敕治鲋邮?,连接管路应尽可能短,且接口切面平滑,以减少死体积,降低柱外展宽效应。
卡套式保护柱一般未标注液流方向,使用时最好自行标注,并按照标注方向来使用,以免正反向使用后,截留的杂质污染分析柱。
2、维护与清洗:
保护柱或柱芯一般不建议超声清洗,因可能对填料表面修饰有影响。
如同一?;ぶ洳煌姆治鲋褂?,每次使用前,?;ぶ柘惹逑床⒂昧鞫嗥胶獗;ぶ欢问奔浜?,再接分析柱使用。
3、更换时机:
当柱压升高>10%,柱效下降>10%,以及分离度下降>10%时,这些均是提醒要维护保护柱的信号。
选择合适的?;ぶ雌ヅ渖字枰酆峡悸嵌喔鲆蛩兀ㄌ盍侠嘈?、柱尺寸、样品特性、分析需求、保护柱的结构和连接方式等。通过合理选择和使用保护柱,可以有效延长色谱柱的使用寿命,提高分析结果的准确性和稳定性。
发布于: 2025-01-10

